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單克隆抗體的基本概念

單克隆抗體是指由淋巴細胞雜交瘤產生的、只針對復合抗原分子上某一單個抗原決定簇的特異性抗體。淋巴細胞雜交瘤是用人工方法使骨髓瘤細胞(純系小鼠的腹水瘤型漿細胞)與已用抗原致敏并能分泌某種抗體的淋巴細胞(常用致敏動物的脾細胞,起作用的是其中的B細胞)融合而成的。用來使上述淋巴細胞致敏的抗原有人和動物的T細胞、B細胞、紅細胞、腫瘤細胞、各種微生物或其他抗原物質等。這種融合細胞既具有腫瘤細胞能大量、無限繁殖的特性,又具有B細胞能合成分泌特異性抗體的能力。由于一個B細胞克隆只針對一個抗原決定簇產生相對應的抗體,所以一個B細胞與骨髓瘤細胞融合而成的單個雜交瘤細胞,也只產生某種單一的抗體。采用適當方法把雜交瘤細胞分離出來,進行單個細胞培養,使之大量繁殖,則在該培養液中增殖而形成的細胞克隆,只產生完全均一的、單一特異性的抗體,即單克隆抗體。若把能產生特異性抗體的單克隆雜交瘤進行大量培養,或注入原系動物腹腔中,則雜交瘤仍以腹水型方式生長,在培養液或腹水中會含有大量單克隆抗體。用雜交瘤技術制備出來的單克隆抗體純度高、專一性強、效價高,使用時可免除不同細胞及微生物種或株間血清學上的交叉反應,大大提高了診斷的特異性及敏感性。另外,在研究細胞表面標志、提純可溶性抗原、進一步研究抗體的結構和功能等方面都起著十分重要的作用。 

單克隆抗體的應用

把單克隆抗體與抗癌藥物毒素結合起來,就成為威力強大的抗體“生物導彈”。把這種抗體“導彈”注射到癌癥患者的血液中,它就會發揮導彈樣的作用,在患者體內追蹤并附著于癌細胞上,然后與抗體結合的抗癌藥物或毒素殺傷和破壞癌細胞,而且很少損傷正常組織細胞。這種抗體“導彈”具有高度選擇性,對癌細胞命中率高,殺傷力強的優點,沒有一般化學藥物那樣不分好壞細胞,格殺勿論的缺點。美國約翰·霍普金斯醫院應用抗體“導彈”治療晚期肝癌病人,收到驚人效果。肝臟腫癌顯著縮小,生存期延長,而且沒有副作用。單克隆抗體技術的發明,是免疫學中的一次革命,打破了過去只能在身體內產生抗體的方法,而成功地在體外用細胞培養的方法產生抗體,同時繁殖快,可以產生在體內達不到的高滴度和高專一性的水平。它來自于每一個細胞,所以非常純凈。

單克隆抗體在疾病的診斷和治療預防方面,與常規的抗體相比,特異性強,靈敏度高,優越性非常明顯,可利用此特性制成“生物導彈”用來運送藥物至病害部位,主要是癌細胞。

單克隆抗體在生物學和醫學研究領域中顯示了極大的應用價值,是親和層析中重要的配體,是免疫組化中主要的抗體,是免疫檢驗中的新型試劑,是生物治療的導向武器。

作為醫學檢驗試劑,單克隆抗體可以充分發揮其優勢。單克隆抗體的特異性強,可將抗原抗體反應的特異性大大提高,減少了可能的交叉反應,使試驗結果可信度更大。單克隆抗體的均一性和生物活性單一性使抗原抗體反應結果便于質量控制,利于標準化和規范化。目前已有許多檢驗試劑盒用單抗制成,其主要用途如下:

 1.診斷各類病原體

這是單克隆抗體應用最多的領域,已有大量的商品診斷試劑供選擇。如用于診斷乙肝病毒、皰疹病毒巨細胞病毒EB病毒和各種微生物感染的試劑等。單克隆抗體具有靈敏度高、特異性好的特點。尤其在鑒別菌種型及亞型、病毒變異株以及寄生蟲不同生活周期的抗原性等方面更具獨特優勢。 

2.腫瘤特異性抗原和腫瘤相關抗原的檢測

用于腫瘤的診斷、分型及定位。盡管目前尚未制備出腫瘤特異性抗原的單克隆抗體,但對腫瘤相關抗原(例如甲胎蛋白癌胚抗原)的單克隆抗體早已用于臨床檢驗。

近年來,有人利用單克隆抗體進行腫瘤分型,對制定治療方案和判斷預后也有幫助。用抗腫瘤單抗檢查病理標本,可協助確定轉移腫瘤的原發部位。以放射性核素標記單克隆抗體主要用于體內診斷,結合X線斷層掃描技術,可對腫瘤的大小及其轉移灶作出定位診斷。

3.檢測淋巴細胞的表面標志

用于區分細胞亞群和細胞分化階段。例如檢測CD系列標志,有助于了解細胞的分化和T細胞亞群的數量和質量變化,對多種疾病診斷具有參考意義。對細胞表面抗原的檢查在白血病患者的疾病分期、治療效果、預后判斷等方面也有指導作用。組織相容性抗原是移植免疫學的重要內容,而應用單克隆抗體對HLA進行位點檢查與配型可得到更可信的結果。

4.機體微量成分的測定

應用單克隆抗體和免疫學技術,可對機體的多種微量成分進行測定,如諸多酶類、激素維生素、藥物等;對受檢者健康狀態判斷、疾病檢出、指導診斷和治療均具有實際意義。

上述應用的單克隆抗體屬于鼠源性,作為體外診斷試劑是滿意的。鼠源單克隆抗體如作為生物制劑應用于人體,則因是異性蛋白可引起過敏反應甚至危及生命。從臨床治療及預防疾病的要求,希望制備出人源性單克隆抗體。目前雖然已有文獻報道,通過人-鼠細胞雜交及人-人細胞雜交進行了一些探索,但對這些細胞株培養很不穩定,融合細胞中人的染色體往往呈選擇性丟失,以致細胞株難以維持培養。因此制備人源單克隆抗體是目前急待解決的問題。


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